ELISA實驗干貨丨如何選擇試劑盒

　　要問科研最怕遇到的糟心事，非買到科研試劑莫屬了，用不好的試劑無非導致兩種結果：實驗失敗or被動學術造假。ELISA試劑盒門檻較低，制假相對簡單，常有不法商家打著種屬全、指標全、現貨供應的旗號來生產、銷售壞ELISA試劑盒，曾有老師吐槽“每個月都能收到好幾個從未聽過的廠商向我ELISA試劑盒"。針對ELISA試劑盒真假問題，我們整理了一些辨別經驗(購買前and購買后)，希望對大家有所幫助。

　　購買前

　　1.選擇正規公司

　　進口試劑盒盡量選擇Thermo、 R&D等公司;國產試劑盒一定要選擇大型正規企業，比如聯科生物。將“廠家名"、“ELISA"和“假貨"等關鍵詞在網上搜索，有的網站或論壇如丁香園等會有打假曝光平臺。正規廠商的ELISA試劑盒通常有技術發明支撐和ISO9001國際質量體系認證，且廠家會定期收集整理試劑盒的文獻引用情況，購買前可向廠家索要相關材料加以核實。

　　2.試劑盒性能參數

　　向廠家索要或從其下載產品說明書和質控報告，查找ELISA試劑盒的關鍵質控性能參數：準確度(加標回收率、稀釋線性)、精密度(板內差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準。如果無法提供這些性能參數數據，則說明試劑盒開發過程不夠科學嚴謹，并未做試劑盒性能測試從而無法得到準確真實的結果，也有極大可能是假貨試劑盒。

　　3. 不常見指標的選擇

　　如需檢測不常見物種的樣本(如禽類、豬、羊等)，可選擇靠譜的生物網站或好的ELISA試劑盒供應商。其實，“貨比三家"有時會有一些“驚喜"，也許你會發現：某個公司的說明書除了指標名稱不一致，其他內容基本一樣;某個指標，幾家公司試劑盒的性能參數是一樣…一定要記?。宏P于網上宣傳有所有種屬所有指標ELISA試劑盒的公司，那真的是再謹慎也不為過。

　　4. 所有指標常備現貨

　　抗體并不十分穩定，針對非熱門研究指標，廠家為保證產品質量通常不會長期備現貨，若承諾相對冷門的ELISA試劑盒能隨時發貨，那需謹慎考慮是否要選擇該供應商。

　　購買后

　　1.檢查

　　檢查說明書、包裝盒的質量，通常不好偽劣產品為了降低成本，印刷的質量會比較差。其次仔細閱讀說明書，如上所示查找ELISA的性能指標。

　　2.實驗

　　(1)利用干擾實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原

　　a. 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液;

　　b. 37℃孵育15分鐘后，代替原試劑盒中的檢測抗體;

　　c. 后續操作按照試劑盒說明書進行，加檢測抗體、酶復合物和底物;

　　d. 實驗完畢后，檢測其標準曲線，如果標準曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配，試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原，該試劑盒為假貨ELISA試劑盒;

　　e. 如果標準曲線無線性，則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾，影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用，則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。

　　(2)如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B，利用交叉實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否造假

　　a. 取出購買的試劑盒A的包被板兩條;

　　b. 一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線;

　　c. 另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線;

　　d. 后續操作按照試劑盒說明書進行，加檢測抗體、酶復合物和底物;

　　e. 實驗完畢后，檢測兩條標準曲線，如果兩條標準曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標而非A和B，即該試劑盒為假貨ELISA試劑盒;

　　f. 如果兩條標準曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標，試劑盒A只能檢測A，不能檢測B，即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。

　　上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。古朵試劑盒